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一、改良磷酸鹽緩沖液基本概述
英文名稱:PSB;Phosphate Saline Buffer Modified
級(jí)別:BR
成分(g/L)
磷酸氫二鈉:8.23
磷酸二氫鈉:1.05
山梨醇:10.0
氯化鈉:5.0
3號(hào)膽鹽:1.5
蛋白胨:5.0
PH:7.6±0.2,25℃
用法:稱取本品30.78g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中, 121℃高壓滅菌15分鐘,備用
性狀:干燥粉末。易吸濕。
用途:生化研究。用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng)
保存:RT
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基用途:
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基可快速檢測(cè)食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結(jié)果可在3天內(nèi)檢測(cè)完成。單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,菌落周圍有一不透明環(huán)。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長(zhǎng),抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基分類
按其組成成分分成三類:
①天然培養(yǎng)基,全由天然產(chǎn)物組成,例如含淀粉、黃豆餅粉等天然物質(zhì);
②復(fù)合培養(yǎng)基,由部分天然產(chǎn)物和部分已知成分的化合物組成,例如其中的氮源既有天然物質(zhì)黃豆餅粉,又有合成化合物硫酸銨;
③合成培養(yǎng)基,全由已知成分的化合物所組成,例如以純的碳水化合物或碳?xì)浠衔餅樘荚,以銨鹽為氮源。天然培養(yǎng)基和復(fù)合培養(yǎng)基常用于工業(yè)生產(chǎn),而合成培養(yǎng)基(偶爾包括復(fù)合培養(yǎng)基)則常用于試驗(yàn)。
改良磷酸鹽緩沖液按用途分類包括:
①基礎(chǔ)培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)需求相似的一些生物其所需的營(yíng)養(yǎng)物大體相同,因之可配制一種適合于它們共同需要的含有基本營(yíng)養(yǎng)成分的基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
②增殖培養(yǎng)基,又稱豐富培養(yǎng)基,常用于菌種選育方面。它是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再加入特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以使某種差異型微生物在其中迅速生長(zhǎng)繁殖;
③鑒別培養(yǎng)基,即在培養(yǎng)基中加入某種試劑,從而在培養(yǎng)過程中表現(xiàn)出特殊反應(yīng),用以鑒別不同類型的微生物,如無(wú)菌試驗(yàn)用的酚紅肉湯培養(yǎng)基,就是一種鑒別培養(yǎng)基;
④選擇培養(yǎng)基,根據(jù)某些微生物具有特殊營(yíng)養(yǎng)要求,或?qū)δ承┗瘜W(xué)物質(zhì)具有抗性而設(shè)計(jì)的,例如在配方中加入某種化學(xué)藥物,以限制對(duì)敏感菌的生長(zhǎng)繁殖,而將對(duì)其不敏感的所需的微生物分離出來(lái)。如在分離酵母菌時(shí),可加入青霉素、鏈霉素等以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基還可根據(jù)其形態(tài)分成液體或固體培養(yǎng)基。例如用于無(wú)菌試驗(yàn)的肉湯培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。用于培養(yǎng)青霉菌孢子的小米或大米為固體培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中加入適量瓊脂而形成的凝膠培養(yǎng)基,也稱固體培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的過濾澄清
液體培養(yǎng)基必須絕對(duì)澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養(yǎng)基加入1-2個(gè)雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
當(dāng)“改良磷酸鹽緩沖液”分裝在大的容器(1L或更大時(shí))中時(shí),可能會(huì)因?yàn)檠娱L(zhǎng)滅菌加熱時(shí)間而造成 熱降解。因此在高壓滅菌前,最好先將培養(yǎng)基成分溶解后分裝到較小的容器中。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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