當(dāng)前位置:首頁(yè) >> 產(chǎn)品中心 >> 生化試劑 >> 酶試劑 >> T4 DNA連接酶
“T4 DNA連接酶”參數(shù):
英文名稱(chēng):T4 DNA Ligase
CAS號(hào):9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體級(jí)別: BR
來(lái)源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過(guò)200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物質(zhì)量控制:測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè):粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對(duì)單鏈核酸無(wú)酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存: -20°C
生化試劑:
生化試劑是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機(jī)化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。由于生命科學(xué)面廣、發(fā)展快,因此該類(lèi)試劑品種繁多、性質(zhì)復(fù)雜。
分光純:
分光純?cè)噭┦侵甘褂梅止夤舛确治龇〞r(shí)所用的溶液,有一定的波長(zhǎng)透過(guò)率,用于定性分析和定量分析。
光譜純:
光譜純?cè)噭┩ǔJ侵附?jīng)發(fā)射光譜法分析過(guò)的、純度較高的試劑。
產(chǎn)品結(jié)算方式:款到發(fā)貨;(長(zhǎng)期合作老客戶(hù)可享受優(yōu)先發(fā)貨權(quán))
產(chǎn)品到貨方式:物流、汽運(yùn)、 EMS 、韻達(dá)、四通一達(dá)運(yùn)輸均可,款到當(dāng)天發(fā)貨,國(guó)內(nèi) 2~4 天到貨。
“T4 DNA連接酶”訂購(gòu)流程:
1、產(chǎn)品詢(xún)價(jià):您可以通過(guò)電話(huà)、郵件、傳真或在線(xiàn)客戶(hù)方式詢(xún)價(jià),請(qǐng)報(bào)您所需的產(chǎn)品名稱(chēng)或CAS號(hào)進(jìn)行查詢(xún)。同時(shí),請(qǐng)?zhí)峁┠馁Y料(含單位名稱(chēng)、聯(lián)系地址、聯(lián)系人、電話(huà)、及收貨地址和傳真)以便第一時(shí)間為您建立客戶(hù)信息,以便后期直接下單。
2、產(chǎn)品報(bào)價(jià):銷(xiāo)售代表會(huì)據(jù)您的需求,與內(nèi)部相關(guān)部門(mén)核實(shí)庫(kù)存并進(jìn)行報(bào)價(jià)。期貨產(chǎn)品會(huì)給出定制時(shí)間。
3、確認(rèn)需求:請(qǐng)您確認(rèn)實(shí)際需求的產(chǎn)品名稱(chēng)、規(guī)格包裝、含量、數(shù)量、開(kāi)票需求、付款方式和發(fā)貨方式、運(yùn)費(fèi)。在線(xiàn)注冊(cè)好的會(huì)員提交訂單后需要及時(shí)與在線(xiàn)客服聯(lián)系,確認(rèn)現(xiàn)貨和運(yùn)費(fèi),銷(xiāo)售代表會(huì)將最終訂貨合同發(fā)給您。
4、簽定合同: 擬定合同,雙方簽字蓋章確認(rèn),請(qǐng)注意產(chǎn)品的報(bào)價(jià)有效期,務(wù)必在有效期內(nèi)處理。
5 費(fèi)用支付:在雙方確認(rèn)了訂單內(nèi)容和產(chǎn)品籌備周期之后,請(qǐng)您按照下面的帳號(hào)支付服務(wù)費(fèi)用/貨款。
6 確認(rèn)付款:公司用戶(hù)底單確認(rèn):請(qǐng)您在匯款后,將匯出銀行提供的匯款底單傳真至酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測(cè)中心財(cái)務(wù)部,以便我們及時(shí)確認(rèn)。
“T4 DNA連接酶”是我公司重點(diǎn)推廣產(chǎn)品,我公司有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請(qǐng)放心購(gòu)買(mǎi)。發(fā)貨時(shí)均會(huì)附上質(zhì)檢報(bào)告單、使用說(shuō)明書(shū)和推薦用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
標(biāo)簽:T4 DNA連接酶 T4 DNA Ligase 9015-85-4
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