男女一級免費視頻_亚洲天堂精品国产一区_亚洲精品欧美专区中文字幕_色影音先锋av资源网_麻豆视频欧美少妇_韩国三级电影久久_亚洲视频第二页_三年片免费高清版_中字无码AV点击进入_精品日韩欧美在线观看91

技術(shù)服務(wù)專(zhuān)區(qū)
酶聯(lián)免疫(ELISA)代測(cè)服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的..
組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
組織包埋,切片,免疫組化,免疫熒光,偏振光,原位雜交,凋亡,常規(guī)染色,特殊染色,組織形態(tài)圖..
Western Blot實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應(yīng),先將蛋白通過(guò)SDS-PAGE凝膠電泳分離開(kāi),再利用電場(chǎng)力的作..
解決方案

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)操作步驟

閱讀次數(shù):255    發(fā)布時(shí)間:2024/10/15 11:15:33

1.基本原理 

將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化( Transformation )。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面,經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理,促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后,球狀細(xì)胞復(fù)原并分裂增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中,外源基因得到表達(dá)。在選擇性培養(yǎng)平板上,可選出所需的轉(zhuǎn)化子(即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌)。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞,一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ~ 10 6 個(gè)轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外,還有電穿孔法( Electroporation ),其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ~ 10 10 個(gè)轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。
 
2.器材 
①培養(yǎng)皿  ②恒溫培養(yǎng)箱
 
3.試劑 
① LB 培養(yǎng)基
②選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板(含氨芐青霉素,終濃度為 50μg/ml )
③氨芐青霉素 100 mg/ml
④宿主細(xì)菌:經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α
 
4.操作步驟 
①取 50 μL 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,加入適量質(zhì)粒(體積不得超過(guò) 4 μL )冰浴 30 min 后, 42℃ 熱激 90 s ,馬上放回冰上,冰浴 2 min ;
②加 400 μL LB 培養(yǎng)基,于 37℃ 搖床慢搖振蕩培養(yǎng) 45-60 min ;
③取 50-100 μL 涂在含有氨芐青霉素( 100 μg/mL )的 LB 固體培養(yǎng)基上, 37℃ 倒置培養(yǎng)過(guò)夜。
 
更多實(shí)驗(yàn)資訊可咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員。上海恒遠(yuǎn)生物專(zhuān)業(yè)提供生命科學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù),提供全方位實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動(dòng)的時(shí)間和精力,我們有過(guò)硬的技術(shù)咨詢(xún)和完善的售后服務(wù),購(gòu)買(mǎi)ELISA試劑盒贈(zèng)送免費(fèi)代測(cè)服務(wù),在線一對(duì)一技術(shù)指導(dǎo),為您解決后顧之憂。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

品質(zhì)保證

防偽易碎商標(biāo)貼,四招助您分辨真假。

送貨保障

產(chǎn)品均有現(xiàn)貨,多家快遞公司合作準(zhǔn)時(shí)到達(dá)。

售后服務(wù)

產(chǎn)品及實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,提供技術(shù)支持保障。

  • 電話:18221656311
  • 手機(jī):18221656311
  • 聯(lián)系人:錢(qián)經(jīng)理

上海恒遠(yuǎn)免疫學(xué)第三方檢測(cè)中心

微信掃描二維碼,參與上海恒遠(yuǎn)活動(dòng),

勁爆優(yōu)惠觸手可得!

主營(yíng)產(chǎn)品:

酶聯(lián)免疫試劑盒,酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)代測(cè),elisa試劑盒,原裝elisa試劑盒,elisa檢測(cè)試劑盒,進(jìn)口血清

公司名稱(chēng):上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 公司地址:上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園B座 郵政編碼:201615 郵箱:2885617636@qq.com

聯(lián)系人:錢(qián)經(jīng)理 聯(lián)系電話:18221656311 ICP備案號(hào): 滬ICP備11004148號(hào)-22 技術(shù)支持:阿儀網(wǎng)

嬌嬌

小李

小強(qiáng)

小李

小錢(qián)