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技術(shù)服務(wù)專區(qū)
酶聯(lián)免疫(ELISA)代測服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的..
組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
組織包埋,切片,免疫組化,免疫熒光,偏振光,原位雜交,凋亡,常規(guī)染色,特殊染色,組織形態(tài)圖..
Western Blot實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應(yīng),先將蛋白通過SDS-PAGE凝膠電泳分離開,再利用電場力的作..
解決方案

ELISA試劑盒靈敏度低?

閱讀次數(shù):247    發(fā)布時間:2024/9/26 9:34:04

近日,有客戶在做完實(shí)驗(yàn)后,反映陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的?我司技術(shù)整理后給出如下解析,邀您來看看!

 
容易造成的原因有:
1.試劑盒必須在有效期內(nèi)使用, 超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號;
2.試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響;
3.試劑、樣品用前未平衡至室溫;
4.加入試劑的體積和時間有誤,移液器計(jì)量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;
5.洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力;
6.孵育時間及孵育溫度未達(dá)到要求 ,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調(diào)整;
7.洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時間太長;
8.顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入;
9.底物作用時間不夠;
10.蒸餾水水質(zhì)有問題。
 
解決辦法:
1.實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號,確認(rèn)試劑未過期。
2.不要將試劑盒長時間置于常溫下,按使用規(guī)定儲藏。
3.確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當(dāng)。
4.校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應(yīng)完全。
5.確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未受污染。
6.孵育溫度應(yīng)控制在 37-38℃,孵育時間嚴(yán)格按照說明書操作。保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫。
7.嚴(yán)格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數(shù)。
8.顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
9.準(zhǔn)確定時。
10.測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響。
 

上海恒遠(yuǎn)生物專業(yè)提供生命科學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù),提供全方位實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動的時間和精力,我們有過硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務(wù),購買ELISA試劑盒贈送免費(fèi)代測服務(wù),在線一對一技術(shù)指導(dǎo),為您解決后顧之憂。

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