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三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基概述
英文名稱:TSI Agar;Triple Sugar Iron Agar
其他名稱:三糖鐵培養(yǎng)基;TSI瓊脂
級別:BR
成分(g/L)
蛋白胨:20.0
牛肉浸膏:5.0
乳糖:10.0
蔗糖:10.0
酚磺酞:0.025
葡萄糖:1.0
氯化鈉:5.0
硫酸亞鐵:0.2
硫代硫酸鈉:0.2
瓊脂:12.0-15.0
PH:7.2-7.6
用法:取本品64g,加1000ml蒸餾水,加熱煮沸至完全溶解,115℃滅菌30分鐘后制成較高直立段斜面,備用
質(zhì)量控制:中國藥典2005年版
性狀:粉紅色粉末。一種鑒別培養(yǎng)基。易吸濕。加水煮沸溶化后,成橘紅色半透明液體
用途:生化研究。用于腸桿菌科細菌的生化試驗。測定細菌有無發(fā)酵葡萄糖、乳糖、蔗糖而產(chǎn)氣和產(chǎn)生硫化氫的能力,初步鑒定革蘭陰性桿菌。
保存:RT
沙門氏顯色培養(yǎng)基用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中沙門氏菌的快速檢測。除傷寒沙門氏菌(在培養(yǎng)基上顯無色)不能直接鑒定外,其它沙門氏菌顯亮紅色,大腸桿菌和大腸菌群顯藍色,枸櫞酸桿菌顯紫色,其它細菌顯黃色或無色。在食品污染中,主要的沙門氏菌為非傷寒沙門氏菌外的其它沙門氏菌,本培養(yǎng)基的特異性非常高,可達98%,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基的滅菌
一般培養(yǎng)基可采用121℃ 高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。
某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20% 如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應從無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃ 左右的培養(yǎng)基中。
瓊脂斜面培養(yǎng)基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當斜面、待其自然凝固。
培養(yǎng)基添加成分的制備
制備含有有毒物質(zhì)的添加成分(尤其是抗生素)時應小心操作(必要時在通風櫥中操作)。
按說明書操作,注意有效期。
抗生素工作溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配。
批量配制抗生素溶液分裝后冷凍儲存,解凍后不能再次冷凍使用。
廠商應提供冷凍對抗生素活性影響的有關(guān)資料,也可由使用者自行測定。
培養(yǎng)基的質(zhì)量測試
每批培養(yǎng)基制備好以后.應仔細檢查一遍:如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應挑出棄去。并測定其最終pH。將全部培養(yǎng)基放入36±1℃ 恒溫箱培養(yǎng)過夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長,即棄去。用有關(guān)的標準菌株接種1-2 管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24- 48 小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結(jié)果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應棄去,不能使用。
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