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一、酪蛋白胨基本概述
英文名稱:Casitone
其他名稱:酪胨;胰酪胨;胰酪蛋白胨
級別:BR
澄清度:2%水溶液透明,無堿性沉淀及碘酸鹽沉淀。
PH值:5.5-7
總氮:>12%
氨基酸:>4%
氯化物:<1%
色氨酸:>0.8%
灰分:<13%
水分:<5%
細菌學指標
硫化氫試驗:陽性
靛基質試驗:陽性
V-P試驗:陽性
可發(fā)酵糖試驗:陰性
色素生成試驗:菌落色澤純正
營養(yǎng)試驗:接種金黃色葡萄球菌和大腸桿菌,37oC培養(yǎng)24小時,菌落直徑應在1.00mm以上,95%以上為S型菌型。
靈敏度試驗:32210菌株生長至10-5,7316菌株生長到10-4
性狀:本品是用酪蛋白經(jīng)胰酶水解精致而成,呈淡黃或類白色粉末。
用途:生化研究。廣泛用于細菌培養(yǎng)基的制備
保存:RT
二、酪蛋白胨具體說明
O157顯色培養(yǎng)基操作說明為例
用途:用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
大腸桿菌O157 顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中 O157 菌的快速檢測。 O157 菌顯紫色,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色;其它細菌顯黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服 SMAC 培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
成份 (g/L)
特殊營養(yǎng)物質 50.0
混合顯色劑 2.5
瓊脂 15.0
pH 7.0 ± 0.1 25 ℃
CT 添加劑 1ml/ 支 *5
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
用法
稱取本品 13.5g 加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 10-20 分鐘。冷卻至 45-50 ℃時,加入 CT 添加劑混勻,
傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國家標準、 SN 標準、 FDA 標準或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC 肉湯或 mTSB 肉湯中, 37 ℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時;
3 、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到 O157 菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個平板;
4 、 37 ℃培養(yǎng) 18-24h , O157:H7 菌顯紫色 , 大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色, 其它細菌顯黃色或無色;
5 、對典型菌落可做 O157:H7 菌血清學試驗和全套生化試驗。
質量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡藍色。制備好的平板呈藍色色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗
在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18-24h 小時:
質控菌株 ATCC 生長情況 菌落顏色
大腸桿菌 O157 +++ 紫色
金黃色葡萄球菌 25923 -/+ 黃色
大腸桿菌 25922 +++ 暗藍色
沙門氏菌 +++ 藍色
奇異變形桿菌 +++ 無色
方法的局限性
本培養(yǎng)基對典型大腸桿 O157:H7 必須做血清學試驗或生化試驗。
典型特征
典型 O157:H7 菌顯紫色 , 大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色。
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