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一、鵝去氧膽酸基本概述
英文名稱:CDCA;Chenodeoxycholic acid;3alpha,7alpha-Dihydroxy-5beta-cholanic acid;Chenodiol
其他名稱:脫氧鵝膽酸;鵝脫氧膽酸;3α,7α-二羥基膽質酸;3α,7α-二羥基-5-β-膽烷酸;護肝素
CAS號:474-25-9
C24H40O4=392.57
級別:BR
含量:≥98.0%(滴定法)
比旋光度:+11~+15°
干燥失重:≤2.0%
氯化物:合格
灼燒殘渣:≤0.20%
性狀:白色或淡黃色結晶粉末。味苦、有異臭。易溶于乙醇、甲醇、丙酮和乙酸,幾乎不溶于水、石油醚和苯。熔點:113℃
用途:生化研究。主要用于合成熊去氧膽酸
保存:RT
細菌總數(shù)菌顯色培養(yǎng)基用途:
細菌總數(shù)菌顯色培養(yǎng)基主要是用于快速檢測食品、水質和環(huán)境中的細菌總數(shù),細菌顯紅
色。
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基主要是用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍綠色,大腸菌群顯無色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。
培養(yǎng)基和試劑消毒處理方法
培養(yǎng)基通常采用高壓濕熱滅菌法121 ℃滅菌15分鐘,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要
求進行滅菌(如含糖培養(yǎng)基115 ℃滅菌20分鐘)。
部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基),只能煮沸滅菌。
對熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質,應采用膜過濾方法進行過濾除菌。
即用型試劑不需滅菌,應參見相關國際標準或供應商使用說明,直接使用。
器具和設備消毒處理方法
濕熱滅菌:采用高壓滅菌器, 121 ℃滅菌20分鐘,適用于玻璃器皿、移液器吸頭
、塑料瓶等。按照GB 15981 的規(guī)定,評價高壓滅菌器的殺菌效果。
干熱滅菌:采用干燥箱滅菌,160 ℃滅菌2h,180 ℃滅菌2h,適用于玻璃器皿,不
銹鋼器具等。
鵝去氧膽酸操作方法和注意事項如下
加水
打開滅菌鍋蓋,向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋最好用已煮開過的水,以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存。注意水要加夠,防止滅菌過程中干鍋。裝料、加蓋滅菌材料放好后,關閉滅菌器蓋,采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣。
排氣
打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出,當有大量蒸汽排出時,維持5min,使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。
升壓、保壓和降壓
當鍋內(nèi)冷空氣排凈時,即可關閉排氣閥,壓力開始上升。當壓力上升至所需壓力時,控制電壓以維持恒溫,并開始計算滅菌時間,待時間達到要求(一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃,20min)后,停止加熱,待壓力降至接近“0”時,打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣,否則會由于瓶內(nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶內(nèi)液體沖出容器之外。
滅菌后的培養(yǎng)基空白培養(yǎng)
滅菌后的培養(yǎng)基放于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),經(jīng)24h培養(yǎng)無菌生長,可保存?zhèn)溆;斜面培養(yǎng)基取出后,立即擺成斜面后空白培養(yǎng);半固體的培養(yǎng)基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后,空白培養(yǎng)。
干熱滅菌法
通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后,放入電烘箱中烘烤,即加熱至160~170℃維持1~2h。
干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品,液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。
滅菌前的準備
玻璃器皿等在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞,以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞方法如下:平皿用紙包扎或裝在金屬平皿筒內(nèi);三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙,用棉繩以活結扎緊,以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染;吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心,輕輕捅入管口,松緊必須適中,管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去,滅菌時將吸管裝入金屬管筒內(nèi)進行滅菌,也可用紙條斜著從吸管尖端包起,逐步向上卷,頭端的紙卷捏扁并擰幾下,再將包好的吸管集中滅菌。
干燥箱滅菌
將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi),注意不要擺放太密,以免妨礙空氣流通;不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160~170℃并恒溫1~2h,注意勿使溫度過高,超過170℃,器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿,溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60~70℃時方可打開箱門,取出物品,否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。
用此法滅菌時,絕不能用油、蠟紙包扎物品。
火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌,迅速徹底。對于接種環(huán),接種針或其它金屬用具,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采用通過火焰而達到滅菌的目的。
結果
記錄各種不同物品所用的滅菌方法及滅菌條件(溫度、壓力等)。
試述高壓蒸汽滅菌的過程及注意事項。
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