閱讀次數(shù):1195 發(fā)布時(shí)間:2015/3/10 8:52:29
據(jù)酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測中心黨經(jīng)理了解,進(jìn)入三月中旬,各大院校實(shí)驗(yàn)室開始進(jìn)入正常的工作狀態(tài)中?蒲姓邆冊跒樾聦(shí)驗(yàn)而準(zhǔn)備著,在ELISA實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)測定步驟中也有一定的要求與技巧,今天我們就一起來看看黨經(jīng)理深析ELISA試劑盒的測定評估。
1.試劑的實(shí)用性:試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)。
2.嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間:反應(yīng)時(shí)間過長,酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
3.加樣要準(zhǔn)確、快速:如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且ELISA試劑盒試劑長時(shí)間暴露在外,尤其室溫過高時(shí),保存期會縮短甚至失效。
4.使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。
5.洗滌徹底:洗板不徹底,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。
6.檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
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