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酶聯(lián)免疫(ELISA)代測服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的..
組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
組織包埋,切片,免疫組化,免疫熒光,偏振光,原位雜交,凋亡,常規(guī)染色,特殊染色,組織形態(tài)圖..
Western Blot實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應(yīng),先將蛋白通過SDS-PAGE凝膠電泳分離開,再利用電場力的作..
解決方案

恒遠(yuǎn)生物|如何構(gòu)建細(xì)胞系?

閱讀次數(shù):1073    發(fā)布時(shí)間:2022/5/30 16:58:59

各種已被命名和經(jīng)過細(xì)胞生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或細(xì)胞株 ,都是一些形態(tài)比較均一、生長增殖比較穩(wěn)定的和生物 性狀清楚的細(xì)胞群。因此凡符合上述情況的細(xì)胞群也可 給以相應(yīng)的名稱,即文獻(xiàn)中常稱之為已鑒定的細(xì)胞(Certified Cells)。
 
已鑒定的細(xì)胞可用于各種實(shí)驗(yàn)研究和生產(chǎn)生物制品。當(dāng)前世界上已建的各種細(xì)胞系(株)已難勝數(shù),我國也建有百種以上,并在不斷增長中。
 
體外培養(yǎng)細(xì)胞的種類和命名
 
體外培養(yǎng)細(xì)胞的名稱,隨培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展和細(xì)胞種類的增多而演變。最早采用的名稱為細(xì)胞株(Cell strain),以后又出現(xiàn)細(xì)胞系(Cell Line)一詞,兩者曾一度混用致概念不明確,導(dǎo)致文獻(xiàn)中也很混亂。我國也曾有類似情況,在我國尚未制定出統(tǒng)一名詞前,本書用的名詞基本參考 Schaeffer,W.I.(1979)和國內(nèi)有關(guān)會議、以及國內(nèi)外雜志常用名詞為準(zhǔn)。
 
1、細(xì)胞系(Cell Line):原代培養(yǎng)舞經(jīng)首次傳代成功即成細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系(Lineage of Cells)所組成。
 
2、細(xì)胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物稱為細(xì)胞株。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細(xì)胞株(finitecell strain);如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細(xì)胞株(continuous cell strain)。對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
 
(一)初代培養(yǎng)
 
初代培養(yǎng)又稱原代培養(yǎng),即直接從體內(nèi)取出的細(xì)胞、組織和器官進(jìn)行的第一次的培養(yǎng)物。一旦已進(jìn)行傳代培養(yǎng)(Subculture)的細(xì)胞,便不再稱為初代培養(yǎng),而改稱為細(xì)胞系。
 
(二)細(xì)胞系
 
初代培養(yǎng)物開始第一次傳代培養(yǎng)后的細(xì)胞,即稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限,則稱之為有限細(xì)胞系(Finite Cell Line);已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細(xì)胞系,稱連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系(Infinite Cell Line)。無限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,有的可能已成為惡性細(xì)胞,因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無限細(xì)胞系有的只有永生性(或不死性),但仍保留接觸抑制和無異體接種致癌性;有的不僅有永生性,異體接種也有致瘤性,說明已惡性化。這兩種不同性質(zhì)的無限細(xì)胞系,在國內(nèi)外文獻(xiàn)中對這些名詞的應(yīng)用上也常不十分嚴(yán)格。為概念上的明確,本書中對有惡性的無限細(xì)胞系采用!°惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞系!±一詞表示可能更妥。而對那些只具永生性而無惡性的細(xì)胞系,則用無限細(xì)胞系或轉(zhuǎn)化細(xì)胞系即可。當(dāng)前流傳的 NIH3T3、Rat-1、10T1/2等均屬這類細(xì)胞系。
 
由某一細(xì)胞系分離出來的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系,稱該細(xì)胞系的亞系(Subline)。
 
(三)克隆細(xì)胞株
 
從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,稱細(xì)胞株。再由原細(xì)胞株進(jìn)一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的細(xì)胞群,亦可稱之為亞株(Substrain)
 
(四)二倍體細(xì)胞
 
細(xì)胞群染色體數(shù)目具有與原供體二倍細(xì)胞染色體數(shù)相同或基本相同(2n細(xì)胞占 75%或 80%以上)的細(xì)胞群,稱二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。如僅數(shù)目相同,而核型不同的即染色體形態(tài)有改變者為假二倍體。二倍體細(xì)胞在正常情況下具有限生命期,故屬有限細(xì)胞系。但隨供體年齡和組織細(xì)胞的不同,二倍體細(xì)胞的壽命長短各異。人胚肺成纖維細(xì)胞可傳 50代土 10代,人胚腎只有 8~10代,人胚神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 15~30代;如從老齡個(gè)體取可傳 50則細(xì)胞生存期更短。由不同年齡供體取材建立的二倍體細(xì)胞系可供研究衰老之用。為保持二倍體細(xì)胞能長期被利用,一般在初代或2~5代即大量凍存作為原種(Stook Cells),用時(shí)再進(jìn)行繁殖,用后再繼續(xù)凍存,可供長期使用或延緩細(xì)胞的衰老。
 
(五)遺傳缺陷細(xì)胞
 
從有先天遺傳缺陷者取材(主要為成纖維細(xì)胞)培養(yǎng)的細(xì)胞,或用人工方法誘發(fā)突變的細(xì)胞,都屬遺傳缺欠細(xì)胞。這類細(xì)胞可能具有二倍體核型,也可呈異倍體。
 
(六)腫瘤細(xì)胞系或株
 
這是現(xiàn)有細(xì)胞系中最多的一類,我國已建細(xì)胞系主要為這類細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成,多呈類上皮型細(xì)胞,常已傳幾十代或百代以上,并具有不死性和異體接種致瘤性。
 
對已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱;細(xì)胞的命名無嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定,大多采用有一定意義縮寫字或代號表示。但不論什么形式,均不宜太長,以便記憶和了解。
 
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