閱讀次數(shù):839 發(fā)布時間:2016/3/24 11:10:24
ELISA檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
試劑盒使用指南
步驟 | 常見問題 | 解決方案 |
實驗準備 | 1 加樣器不準確;尤其10ul以下的加樣器,對結果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器最好采用進口產(chǎn)品(芬蘭、法國等); |
樣品加樣 | 1 加樣不準確; | 1 加樣時一定要仔細。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。 |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應靜止30秒鐘; |
加酶反應 | 漏加 | 滴加后,認真檢查各孔 |
試劑保存 | 保存不規(guī)范 | 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對照品 | 對照品為凍干品 | 按對照管標示,加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶,充分溶解混勻?砂凑f明書使用。 |
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原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司
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