閱讀次數(shù)：703 發(fā)布時(shí)間：2015/8/14 11:00:02
丙型肝炎病毒(HCV)能夠?qū)е螺斞蟾窝�。目前尚無特效藥物治療，主要依靠獻(xiàn)血員的篩選來預(yù)防感染。獻(xiàn)血員HCV的診斷主要以抗-CV ELISA、試驗(yàn)方法較為普便。ELISA敏感性高，特異性強(qiáng)，但實(shí)驗(yàn)中條件不當(dāng)亦可造成假陰性和假陽性結(jié)果。為了解實(shí)驗(yàn)室溫度對抗-HCV ELISA檢測結(jié)果的影響，我們進(jìn)行了一些研究。
血清為衛(wèi)生部檢測中心2NC/ml定值質(zhì)控血清，批號(hào)969，不同溫度條件下連續(xù)測定20次。儀器為美國MR-4100酶標(biāo)儀和STATFAX-2600洗板機(jī)�？�-HCV ELISA試劑盒由廈門新創(chuàng)公司提供，批號(hào)970510，操作按說明書。結(jié)果，抗-HCV ELISA試驗(yàn)在不同實(shí)驗(yàn)室溫度6℃，16℃，25℃，30℃，37℃下進(jìn)行，由低至高組觀察了在室溫顯色10分鐘及在37℃顯色10分鐘，發(fā)現(xiàn)其S/co值與A值均升高，顯正相關(guān)。加顯色劑后37℃孵育與室溫避光放置，兩組結(jié)果經(jīng)t檢驗(yàn)，P＜0.001，有顯著性差異。尤其應(yīng)該注意的是6℃組質(zhì)控血清在室溫顯色10分鐘后結(jié)果全部為陰性，16℃組部分呈陰性結(jié)果。據(jù)此，可以看出溫度影響了抗-HCV ELISA試驗(yàn)的觀察結(jié)果。
ELISA其方法原理為抗原與抗體特異性結(jié)合和抗原抗體的酶標(biāo)記，以酶催化底物顯色來判斷結(jié)果。而抗原與抗體的結(jié)合吸酶催化底物的效率均與溫度有關(guān)。溫度高，顯色深，S/co值高，室內(nèi)溫度低，顯色淺，S/co值低，影響結(jié)果觀察。我們對新創(chuàng)公司試劑盒操作方法做了一點(diǎn)改變。將室溫避光顯色8～12分鐘改為37℃水浴箱避光顯色8～12分鐘，其A值及S/co有較大程度的升高。如按其操作說明，6℃組質(zhì)控血清出現(xiàn)全部假陰性結(jié)果，16℃組部分出現(xiàn)假陰性結(jié)果。由于免疫質(zhì)控CV值較一般生化常規(guī)大，如果實(shí)驗(yàn)室溫度較低時(shí)，弱陽性很可能做出假陰性結(jié)果。中國幅源遼闊，國內(nèi)各地溫差極大，如欲保證實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)控結(jié)果準(zhǔn)確，檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)有連續(xù)性和可比性，建議有關(guān)實(shí)驗(yàn)應(yīng)配備溫度調(diào)節(jié)設(shè)備，以25℃為宜。實(shí)驗(yàn)室溫度過低或過高，對實(shí)驗(yàn)室儀器及工作環(huán)境均有很大影響。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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