線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光譜法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
主要用途
線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光譜法定量檢測試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測定與ATP合成對應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光譜法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動物、人體、酵母）以及細胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測�？�用于心肌、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。
技術(shù)背景
線粒體呼吸鏈復(fù)合物V，通常稱為ATP合成酶（ATP synthase）、F型ATP酶（F type ATPase）和F1F0 ATP酶（F1F0 ATPase），是線粒體氧化磷酸化的終極反應(yīng)。其分子量為500KD，含有十六個亞單位，其中兩個：ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個結(jié)構(gòu)域：F0為質(zhì)子通道，由幾個膜蛋白構(gòu)成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycin sensitive conferring protein）等；和F1催化活性結(jié)構(gòu)域，由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其最特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時，呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì)，激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域，促使ATP合成。該酶異常會導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。基于ATP，在寡霉素參與下，受到F1F0 ATP酶的水解，進而通過丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm），來定量分析F1F0 ATP酶活性
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