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技術(shù)服務(wù)專區(qū)
酶聯(lián)免疫(ELISA)代測(cè)服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的..
組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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Western Blot實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應(yīng),先將蛋白通過SDS-PAGE凝膠電泳分離開,再利用電場力的作..
解決方案

ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理的注意事項(xiàng)

閱讀次數(shù):286    發(fā)布時(shí)間:2024/6/4 9:53:13

    ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA試驗(yàn)的關(guān)鍵過程之一,所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細(xì)說說!


    一、均質(zhì)   
    ①安排樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎,混合均勻。    
    ②水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
    ③蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。    
    ④水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去外表的水分,取食用部分。

    二、振動(dòng)提取    
    將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,振動(dòng),使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內(nèi)部,提取待測(cè)組分。
    ①振動(dòng)辦法:振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動(dòng)、手搖式上下振動(dòng)。    
    ②在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時(shí),ELISA試劑盒應(yīng)邊加邊振動(dòng),防止安排凝結(jié)成團(tuán),不利于提取。

    三、乳化現(xiàn)象
    在用有機(jī)溶劑提取過程中,假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,處理的辦法有:    
    ①用細(xì)頭輕輕的拌和,損壞乳化后,再重復(fù)離心。    
    ②再參加適量的提取劑,重新振動(dòng)。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。

    四、濃縮
    因?yàn)閮艋^程中引進(jìn)的溶劑,可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接剖析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈,再用?fù)溶液溶解枯燥殘留物。

    濃縮辦法:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。    
    請(qǐng)注意:
    ①在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)攪擾。    
    ②在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生交叉污染。    
    ③樣本吹干后應(yīng)立即取下,防止吹的時(shí)刻過長,影響zui終檢測(cè)結(jié)果。    
    ④不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。

    五、凈化
    經(jīng)過提取的待測(cè)組分中一般含有一些會(huì)攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測(cè)組分與雜質(zhì)別離的過程,咱們稱為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到常見的凈化是:液液分配法。比方:用復(fù)溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷,在參加正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,能夠60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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